АНАЛИЗ КАЧЕСТВА ПЧЕЛИНОГО ЯДА

Продукты пчеловодства

Полученный от живых пчел (например, путем ужаления стекла) пчелиный яд представляет собой густую, прозрачную жидкость горько-жгучего вкуса, кислой реакции (рН водных растворов 4,5-5,5), плотностью 1,08-1,13. Секрет содержит около 40% сухого остатка и на воздухе через несколько минут затвердевает. Высушенный яд имеет вид прозрачной массы, которая при очистке со стекла превращается в порошок от белого до желтоватого оттенка — яд-сырец.

Пчелиный яд, полученный методом электростимуляции, отличается от вышеописанного несколько большим количеством примесей, соответственно, большей вариацией цветности. Однако удельная активность, качество яда мало уступает нативному яду. В связи с высокой гетерогенностью яда, разные его компоненты обладают неодинаковой сохранностью и устойчивостью к разным воздействиям. Они реагируют с окислителями, кислотами, щелочами. Свет и температура также разрушают полученный продукт, его составные компоненты. При этом чем сложнее структура молекулы, тем менее устойчива она к воздействию. Например, самая неустойчивая к повышенной температуре гиалуронидаза яда. Этот фермент разрушается уже через 25 минут после нагревания до 100° С. Фосфолипаза более устойчива — она выдерживает часовое нагревание при названной температуре. Наиболее стабилен мелиттин. Этот полипептид выдерживает нагревание при 110°С в течение 1,5 часа.

Из изложенного следует, что получить качественный яд непросто, также непросто обеспечить его сохранность. Какими же требованиями руководствоваться при оценке качества яда? Для этого существует несколько методов, часть из которых является официальной, применяемой в отечественной практике.

Все предложенные методы можно разделить на две группы: физико-химические и биологические. Первые дают точные результаты.

Готовят смесь из расчета 1 г талька и 1 мг пчелиного яда. На поверхности стекла равномерно распределяют 50 мг смеси, содержащей 50 мкг пчелиного яда, после чего на эту поверхность накладывают и прокатывают фотоматериал (например, фотобумагу ТУ 6-17-1319-85, торговая марка "Самшит", "Березка"), предварительно обработанный рассеянным светом в течение 30 с и смоченный водой. В этом состоянии фотоматериал выдерживают 60 с, после чего снимают со стекла, промывают водой в течение 30 с (до полного удаления анализируемой смеси) и обрабатывают последовательно растворами проявителя (стандартный № 1) и фиксажем. Весь процесс осуществляется при активном рассеянном свете (естественное освещение). На фотоматериале выявляются следы взаимодействия пчелиного яда с фотографической эмульсией в виде пятен округлой формы низкой оптической плотности. Для составления шкалы на поверхности стекол равномерно распределяют 100, 150, 200, 500 мг смеси, что содержит, соответственно, 100, 150, 200, 500 мкг пчелиного яда. Таким образом, получают шкалу автографов пчелиного яда в диапазоне 50-500 мкг яда. Полученная шкала представляет собой зависимость весового содержания пчелиного яда от количества пятен низкой оптической плотности. Указанная шкала может быть изготовлена по расчету количества яда, содержащегося в таблетках лекарственного средства "Апифор".

Определение количества пчелиного яда в сырье проводят по следующей схеме.

На кончике скальпеля берут пчелиный яд, использовавшийся для изготовления вышеописанной шкалы автографов — стандартизированный в соответствии с временной фармакопейной статьей "Яд пчелиный". К нему добавляют тальк в соответствии 1:100. Смесь растирают в ступке, после чего равномерно наносят на стеклянную пластинку и по вышеописанной схеме получают автограф яда.

Путем визуального сравнения полученных отпечатков со шкалой автографов обнаруживают то или иное количество стандартизированного пчелиного яда. Далее, на кончике скальпеля берут исследуемое сырье, содержащее пчелиный яд. Готовят смесь с тальком. Получают автограф и сравнивают его с аналогичным автографом стандартизированного пчелиного яда и со шкалой автографов, определяя количество пчелиного яда в сырье.